一般情況下，我們都是先種細胞養(yǎng)過夜再轉染，這叫forward transfection，即使起始細胞量較低，細胞活性最好。

若轉染小rna，可同時進行種板和轉染，即細胞懸液和轉染復合物混合在一起，放入細胞培養(yǎng)皿中。reverse transfection。但我試過了。細胞活性不如傳統(tǒng)。forward transfection好吧，這么多protocol建議添加更多的細胞。

如果是轉染dna，通常不建議這樣做，或者誠實forward，一天不差。

此外，lipo3000毒性并沒有想象的那么小，其他轉染試劑，如lipo2000，fugene沒有想象的那么大。但是換液還是需要的，最好6-8在一小時內更換液體，否則細胞活性仍會降低。當然，有些強細胞可能不怕，但我還沒有遇到過這么強的細胞。至少在我常用的細胞系中測試的幾種感染試劑使用一定量的流式。即使在感染6小時后更換液體，第二天也會有大約30%的細胞死亡。